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Marcadores genéticos /Martínez et al./15-30 17

especialmente importante en aquellas regiones en horas (Altamirano, Kelly, Wong, Bessuille, Black y
donde la prevalencia de infección por MNT es elevada, Smith, 1992) y es capaz de demostrar la presencia
como en el noroeste de México (Morán et al., 2000), de fragmentos de DNA micobacteriano en muestras
ya que en enfermedades ocasionadas por ellas se biológicas de pacientes con sospecha clínica de TB
requiere de tratamientos diferentes, por lo tanto, es y con resultados negativos en la tinción de Ziehl-
de suma importancia iniciar un tratamiento específico Neelsen o el cultivo, lo cual resulta particularmente
en forma oportuna y rápida. útil en infecciones no bacilíferas y en enfermos con
Las limitaciones de los métodos tradicionales cuadros atípicos asociados con la infección por el
de laboratorio para la detección e identificación de HIV o con la inmunosupresión por trasplante (Popper,
micobacterias han obligado a implementar nuevas Winter y Höfler, 1994; Saboor, Johnson y McFadden,
estrategias para disminuir el tiempo necesario para 1992). La amplificación de secuencias específicas de
examinar las muestras remitidas al laboratorio clínico. DNA micobacteriano mediante PCR se ha realizado
Las pruebas rápidas y directas que detectan ácidos a partir de cultivos y directamente de muestras
nucleicos resultan atractivas para el diagnóstico de biológicas (Cormican, Barry, Gannon, Flynn, 1992;
la TB en laboratorio (Eisenach et al., 1993). Se han Nolte, Metchock, McGowan, Edwards, Okwumabua,
utilizado sondas de ácidos nucleicos para localizar Thurmond, Plikaytis y Shinnick, 1993).
micobacterias en cultivo, pero carecen de sensibilidad
cuando se utilizan en la detección directa en muestras Genoma de Mycobacterium tuberculosis
biológicas (Lebrun, Espinasse, Poveda, Levy-Frebault, Anteriormente se consideró que el genoma de Mtb
1992), dependiendo del método de extracción del era estable y carecía de polimorfismos. Estudios
material genético y el tipo de muestra. realizados a mediados de la década de 1990
Actualmente, las técnicas moleculares permiten mostraron el descubrimiento de sitios monomórficos
reconocer micobacterias a nivel de especie en aquellas y polimórficos en el genoma de la bacteria, que se
muestras donde los métodos de cultivo y otros puede dividir posiblemente en tres grupos, llamados
procesos convencionales de detección son negativas. polimorfismo de nucleótido sencillo (del inglés
Se está haciendo extensivo el uso de procedimientos SNPs), polimorfismo de secuencia extensa (LSPs) y
de amplificación de genes, tanto para la identificación polimorfismo de secuencias repetitivas. Cuando este
del bacilo tuberculoso a partir de cultivos y muestras último fue sometido a una caracterización posterior,
clínicas, como para la detección molecular de resistencia se revelaron dos clases de DNA: 1) Elementos de
a drogas. Así, se tiene la técnica de reacción en cadena DNA transponibles o repeticiones dispersas, tales
de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) con como secuencias de inserción (IS) y 2) Repeticiones
gran sensibilidad, que en condiciones óptimas puede cortas en tándem; éstas se clasifican, a su vez, en
detectar de 1 a 10 microorganismos. Con los métodos repeticiones polimórficas en tándem (MPTR), las
disponibles de extracción de DNA es posible ahora cuales son básicamente múltiples repeticiones de
identificar micobacterias a partir de cualquier muestra 10 pares de bases (pb) que se separan por unidades
biológica (Barrón, Monteghirfo y Rivera, 2006). intercaladas de 5 pb y se encuentran en diferentes
La PCR es una técnica de Biología molecular que posiciones en el genoma de Mtb, y repeticiones
permite amplificar exponencialmente una secuencia cortas en tándem (STR), conteniendo 49 repeticiones
específica de DNA, localizada por electroforesis de 36 pb cada una, separadas por secuencias cortas
en gel de agarosa teñido con bromuro de etidio. de DNA de 41 pb, llamado DNA espaciador (Desikan y
La técnica puede realizarse en tan sólo 24 a 48 Narayanan, 2015).

Tequio, vol. 1, no. 2, enero-abril, 2018